❝ Новое в пренатальной диагностике и в профилактике наследственных и врожденных болезней у плода человека ❞

Несомненный прогресс, связанный с расшифровкой генома человека, появление новых, высокоразрешающих методов хромосомного анализа и впечатляющие достижения ультрасонографии предопределили быстрое развитие пренатальной диагностики (ПД) [1—4, 8, 10]. Большая практическая и социальная значимость ПД как основного способа профилактики врожденных и наследственных заболеваний продолжает оставаться серьезным стимулом к разработке новых, более чувствительных, эффективных и менее травматичных методов анализа состояния плода.

1. Доимплантационная диагностика Доимплантационная диагностика (ДД) появилась в 90-х годах прошлого века благодаря быстрому развитию вспомогательной репродукции, прежде всего экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и микрометодов, приемлемых для анализа генома единичных клеток, таких, как методы молекулярной цитогенетики (различные варианты FISH) и молекулярной генетики (варианты ПЦР) [19]. В настоящее время список наследственных болезней, доступных ДД, включает не только многие частые моногенные (фенилкетонурия, муко-

висцидоз, гемофилия А), но и практически все основные хромосомные болезни. Спектр заболеваний, доступных для этого вида диагностики, в настоящее время насчитывает более 40 нозологии и включает все частые моногенные и хромосомные болезни [20]. Уже к 2001 г. в мире было проведено более 2500 ДД. После отбора морфологически неполноценных эмбрионов и трансплантации в матку реципиентов оставшихся зародышей в 500 случаях родились здоровые дети. В настоящее время число ДД в мире превысило 10 000 [15]. Эффективность ДД и ее объем в сочетании с быстрым прогрессом методов вспомогательных репродуктивных технологий быстро увеличиваются. Справедливости ради следует отметить, что ДД начинает постепенно внедряться и- в России. В нашей стране она делает только первые шаги и проводится лишь в нескольких центрах вспомогательных репродуктивных технологий Москвы и Санкт-Петербурга.

Причем и в этих центрах она пока ограничена только определением пола плода (планирование семьи и Х-сцепленные заболевания), а также исключением хромосомных болезней [5].

Материалом для ДД являются полярные тельца или отдельные бластомеры, полученные с помощью микроманипулятора от доимплантационных зародышей — продуктов экстракорпорального оплодотворения. В зависимости от исследуемого материала ДД можно подразделить на преконцепционную (анализ полярных телец) и собственно доимплантационную (анализ бластомеров или клеток трофобласта) [19].

Диагностика с использованием полярных телец позволяет отбирать для оплодотворения ооциты, не несущие генных и геномных мутаций. Основная проблема — большая вероятность неточного прогноза о генотипе ооцита при тестировании только 1-го полярного тельца, в котором высока вероятность (50%) кроссинговера. Более точно определить наличие мутации можно только после завершения второго деления мейоза, т. е. по 2-му полярному тельцу, которое образуется уже после оплодотворения яйцеклетки.

Вторая проблема обусловлена особенностями применения молекулярно-генетических методов для диагностики единичной клетки. На результаты ПЦР могут повлиять различные факторы, в частности контаминация образца или условия проведения реакции. Поэтому предобработка материала яйцеклетки (зародыша) и постановка высокочувствительной ПЦР требуют большого опыта и специальных навыков.

Проблема цитогенетического анализа полярных телец заключается в невозможности применения традиционных методов анализа метафазных хромосом. Поэтому для этих целей обычно используют метод гибридизации in situ с флюоресцеинмеченными ДНК-зондами, специфичными к участкам отдельных хромосом (метод FISH). В последние годы разработаны и апробированы методы приготовления хромосом из полярных телец человека, пригодных для стандартного цитогенетического анализа. Предложенные модификации уже позволили провести хромосомный анализ первых полярных телец ... читать далее




[стр.1] ѕерейти на стр.2 ѕерейти на стр.3 ѕерейти на стр.4 ѕерейти на стр.5 ѕерейти на стр.6 ѕерейти на стр.7